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qPCR更精準的診斷 更精確的醫療
即時定量聚合酶連鎖反應(Quantitative real-time PCR,也稱qPCR )是一種利用PCR擴增的原理,使極微量的DNA/PNA放大,再經由光學系統達到即時偵測的一項技術。qPCR技術利用專一的Primer probe(引子探針)在P過程中產生螢光,利用螢光物質與DNA片段結合的特性,由螢光偵測系統來偵測每個循環(cycle)所釋放出的螢光量,達到即時定量的目的。隨著反應進行,螢光強度也將隨之增加。觀察螢光的強度,即可得到欲偵測物的起始濃度差異。
在PCR過程中,原始的樣本會先受熱形成單股的DNA,接著引子進行專一性的結合形成雙股DNA,此時SYBR Green會與雙股DNA進行結合,然後釋放螢光,進而被螢光系統偵測。螢光的訊號則是在每個循環中的annealing或elongation階段被偵測;藉由偵測到的螢光強度回推樣本的含量。
在疾病的檢驗中,RT-PCR用於檢測個體中病毒獨特的基因片段的數量,通常通過循環閥值(CT值)來確定基因片段的數量,而該閥值則是檢驗中產生陽性結果的擴增循環數值。通常樣本的病毒數越高,循環數越少,便足以判定陽性。若循環35次可得陽性結果,CT值即為35。一般CT值隨病毒載量的減少而增加,低CT值表示病毒量高,反之則代表病毒量低。
Real time PCR作為檢驗,不但能定性,也能透過定量來提供醫師治療用藥的重要參考,是值得信賴的檢驗工具。結合臨床症狀,醫師可以完成診斷,讓毛小孩迅速恢復健康。



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